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胶回收纯化 DNA

作者:admin 发布日期:2018-09-21 18:18
1. 琼脂糖电泳,将特异电泳带用刀切下放入到 EP 管中,称琼脂糖带的重量;
2. 按照每 100mg 加400μl 的量加入binding buffer,放入到EP 管振荡器中,45℃~55℃温育振荡,直到所有
的琼脂糖都溶解(大概要5 分钟);
3. 取出纯化柱,将上述溶解液转移至柱中,室温下放置2 分钟,8,000rpm 离心1 分钟,弃EP 管中的液体,将纯
化柱放回EP 管中;
4. 加 500μl 的wash buffer 至柱中,8,000rpm 离心1 分钟。弃管中的溶液;
5. 重复操作 4 步的操作1 次,最后将纯化柱放入EP 管中10,000rpm 离心30 秒,除去痕量的wash buffer;
6. 将纯化柱放入一个新的 EP 管。加30~40μl H2O 或者elution buffer 至纯化柱膜的中央,在37℃或50℃下放
置2 分钟,10,000rpm 离心1 分钟洗脱DNA,将EP 管中的DNA 溶液放在-20℃保存。
7. 注:若想要不电泳而直接纯化DNA 溶液,只需要在第2 步中按100μl 液量加400μl 的binding buffer,其余的
步骤不变。
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