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减少 PCR 产物中引物二聚体的方法

1. 从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法; 2. 可能模板有问题; 3. 模板浓度过小,适当加大模板量; 4. Taq 酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降低它们的浓度... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 17:32:56

PCR 常见问题总汇

PCR 产物的电泳检测时间 一般为48 h 以内,有些最好于当日电泳检测,大于48 h 后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR 反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 17:28:31

PCR 反应条件的选择

PCR 反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR 原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法, 双链DNA 在90~95℃变性,再迅速冷却... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 17:10:53

PCR 反应的重要因素

参加PCR 反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+。 引物 引物是PCR 特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA 互补的程度。理论上,只要知道 任何一段模板... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 17:08:47

PCR 引物设计黄金法则

1.引物最好在模板cDNA 的保守区内设计。 DNA 序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI 上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析 软件(比如DNAman)比对(Alignment),各... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 17:07:46

PCR 概述

PCR 技术概论 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80 年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、 敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:49:11

琼脂糖核酸电泳

1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子; 2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:45:31

琼脂糖凝胶的特点

一、琼脂糖凝胶的特点 天然琼脂(Agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(Agarose,约占80%)及琼脂胶(Agaropectin)组成。琼脂 糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:39:48

DNA 片段回收与纯化----冻融法

质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR 产物经电泳后,常常需要对一些DNA 电泳片段进行回收和纯化,用于亚 克隆、探针标记等。DNA 回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:36:22

真核细胞 DNA 的制备与定量

制备基因组DNA 是进行基因结构和功能研究的重要步骤,通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在 DNA 提取过程中应尽量避免使DNA 断裂和降解的各种因素,以保证DNA 的完整性,为后... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:36:01

酵母、细菌基因组 DNA 提取

1.1 ml 菌体发酵液,10000rpm 离心10 min,去上清液; 2.加500 uL TE 悬浮沉淀,并加10-20 uL Lysozyme 混匀,37 度保温0.5 h; 3.加30 uL10%SDS,3 uL 20ug/ml(或1 mg 干粉)蛋白酶K,混匀,37 度保温... [详情]

分类: 技术资料 2018-09-21 16:18:38

单克隆抗体或将变革感染疾病防治

单克隆抗体(mAbs)是一种经特殊设计、可以靶向单一靶标的新型抗体,已经在对抗癌症和自身免疫疾病中展现出潜力。而根据NIH下属的美国国立过敏和感染疾病研究所(NIAID)的最新文... [详情]

分类: 行业动态 2018-06-15 14:17:34
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